赭曲霉毒素 A (ochratoxin A, OTA)是赭曲霉毒素中 毒性最大、分布最廣、與人類(lèi)健康關(guān)系非常密切的一種 真菌毒素。OTA 最早由 MONTEOLIVA 等檢測(cè)發(fā)現(xiàn), 其強(qiáng)大的毒性包括腎毒性、致畸、致癌、遺傳毒性和免疫 毒性。Infinite M200 PRO 型多功能酶標(biāo)儀(瑞士 TECAN 儀 器公司); Tecnai G2 F20 型場(chǎng)發(fā)射透射電子顯微鏡(美國(guó) FEI 公司); Nicolet iS5 型紅外掃描儀(美國(guó) Thermo Fisher Scientific 公司); CHB-202 型 Thermo Cell 恒溫金屬浴(杭州 博日科技有限公司); NICOMP 380ZLS 型納米粒度 Zeta 電 位分析儀(美國(guó) PSS 公司); SHP-080 型生化培養(yǎng)箱(上海精 宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司); DFY-600 型高速萬(wàn)能粉碎機(jī)(溫嶺 市林大機(jī)械有限公司); Minispin Plus 超高速離心機(jī)(德國(guó) Eppendorf AG 公司)。該方法以氨基功能化的 MSN 作為信號(hào)分子 Rh6G 的載體, 利用帶正電荷的 MSN-NH2 與帶負(fù)電荷的適配體之 間的靜電作用, 將適配體固定在 MSN-NH2顆粒表面, 從而把 熒光染料 Rh6G 封堵在其空穴內(nèi) , 獲 得 aptamer/ MSN-NH2/Rh6G 復(fù)合物, 用于 OTA 的測(cè)定。當(dāng) OTA 存在時(shí), 適配體與 OTA 特異性結(jié)合。

    隨著時(shí)間的增加, 熒光 強(qiáng)度逐漸增強(qiáng)。這可能是因?yàn)殡S著時(shí)間的增加, 更多的適配 體與 OTA 特異性結(jié)合, 從 MSN-NH2表面脫離, 釋放孔中的 Rh6G, 熒光強(qiáng)度增加。當(dāng)反應(yīng)時(shí)間達(dá)到 3 h 后, 熒光強(qiáng)度幾 乎保持不變。此時(shí) OTA 與適配體基本反應(yīng)完全, 無(wú)法使更 多的適配體從 MSN 表面脫離, 溶液中的 Rh6G 基本不變。 因此, 選擇 3 h 作為適配體與 OTA 的孵育時(shí)間。以氨基化的介孔二氧化硅納米材料為載體, 以羅丹明 6G 為熒光信號(hào)分子, 利用適配體與 MSN-NH2 之 間的靜電吸附作用, 通過(guò)OTA與其適配體之間的特異性反 應(yīng), 實(shí)現(xiàn) OTA 的快速檢測(cè), 并將方法成功應(yīng)用于實(shí)際樣品 山藥及薏苡仁中 OTA 的測(cè)定。